《Journal of Comparative Physiology B》的一項研究中，來自北海道醫療大學口腔生物學系生理學分部的H. Ishii團隊發表了題為《Occurrence of parasympathetic vasodilator fibers in the lower lip of the guinea-pig》的研究。該研究聚焦于豚鼠下唇副交感舒血管纖維的存在與否及其起源問題，通過電刺激舌神經、藥物干預及逆行神經追蹤等方法，系統驗證了該纖維的存在性并探究其起源部位。

摘要

本研究旨在探究豚鼠下唇是否存在副交感舒血管纖維。電刺激豚鼠舌神經的中樞切斷端，可引發下唇血流量和全身動脈血壓（SABP）呈強度和頻率依賴性下降。實驗前24小時皮下注射節后交感神經阻滯劑兼抗高血壓藥物胍乙啶（30mg/kg），可降低全身動脈血壓的下降幅度，而舌神經刺激僅在刺激同側引發下唇血流量呈強度和頻率依賴性增加。在經胍乙啶預處理的豚鼠中，舌神經刺激引發的下唇血流量增加可被自主神經節膽堿能阻滯劑六甲銨以劑量依賴性方式抑制。當下唇注射逆行神經示蹤劑熒光金（Fluoro-gold）后，在同側耳神經節中觀察到標記神經元。本研究表明，豚鼠下唇存在源自耳副交感神經節的副交感舒血管纖維，這與先前在大鼠、貓、兔和人類中報道的結果相似。

關鍵詞：副交感舒血管纖維；副交感血管舒張；豚鼠；下唇血流量；三叉神經

實驗材料與儀器

實驗材料

1. 實驗動物：雄性Hartley豚鼠

2. 藥物：胍乙啶、六甲銨、10%烏拉坦、泮庫溴銨、2%熒光金（Fluoro-gold，FG）、0.9%生理鹽水、0.1M磷酸鹽緩沖液、4%多聚甲醛、30%蔗糖溶液。

3. 試劑：用于組織固定和切片的相關試劑，包括明膠包被玻片等。

實驗儀器

雙極銀電極、電刺激器、二氧化碳監測儀、呼吸機、加熱墊、微量注射泵、冷凍切片機、熒光顯微鏡、Omegawave FLO-C1激光多普勒血流儀

實驗過程

1.動物準備

2.舌神經電刺激

分離左側舌神經并切斷，使用雙極銀電極連接電刺激器，對舌神經中樞切斷端進行單側電刺激。

3.指標測量

1. 全身動脈血壓（SABP）測量：股動脈插管，通過壓力傳感器記錄SABP，借助心率計監測心率。

下唇血流量測量：使用Omegawave FLO-C1激光多普勒血流儀監測雙側下唇血流量，探頭輕貼下唇且不施加壓力，通過八通道圖表記錄儀以10mm/min速度連續記錄，通過圖表上的反應高度評估血流量變化，唇血管傳導率=平均血流量變化/平均SABP。

Omegawave FLO-C1激光多普勒血流儀

胍乙啶預處理與未預處理豚鼠中，左側舌神經刺激的強度及頻率依賴性效應對雙側唇部血管傳導性（a、c）和全身動脈血壓（SABP）（b、d）的影響

4.藥物處理

1. 胍乙啶預處理：實驗前24小時給豚鼠皮下注射30mg/kg胍乙啶，以減弱交感神經系統對下唇血流量的影響。

2. 六甲銨干預：給經胍乙啶預處理的豚鼠靜脈注射1mg/kg或10mg/kg六甲銨，30分鐘后重復舌神經電刺激，計算給藥后反應幅度與給藥前對照反應的百分比。

5.軸漿運輸研究

1. 熒光金注射：豚鼠腹腔注射麻醉后仰臥，用微量注射泵以1μL/min速度向下唇左側注射10μL 2%熒光金溶液，注射深度1mm，注射后留針2分鐘避免回流。

2. 組織處理：注射后4天，深度麻醉豚鼠，先灌注200ml 0.1M磷酸鹽緩沖的0.9%生理鹽水，再灌注500ml 4%多聚甲醛的0.1M磷酸鹽緩沖液；取出耳神經節、翼腭神經節和三叉神經節，在4℃、含30%蔗糖的0.1M磷酸鹽緩沖液中保存1天，隨后用冷凍切片機切成40μm切片，貼于明膠包被玻片上。

3. 觀察：通過熒光顯微鏡觀察熒光金標記的神經元。

實驗結論

1. 未預處理的豚鼠中，舌神經電刺激（電壓>5V或頻率>5Hz）可引發SABP明顯下降，雙側下唇血流量呈強度和頻率依賴性下降，且雙側血流量下降幅度無明顯差異。

2. 經胍乙啶預處理后，舌神經電刺激對SABP無明顯影響，但引發同側下唇血流量呈強度和頻率依賴性增加，對側無明顯變化，且血流量增加與SABP變化無關聯。

3. 六甲銨可劑量依賴性抑制胍乙啶預處理后舌神經刺激引發的同側下唇血流量增加（1mg/kg劑量時為對照的47.3±9.7%，10mg/kg劑量時為11.7±11.7%）。

4. 下唇注射熒光金后，在同側三叉神經節（下頜支）和耳神經節中觀察到球形或橢圓形標記神經元，翼腭神經節中未發現標記神經元。

5. 綜上，豚鼠下唇存在源自耳副交感神經節的副交感舒血管纖維，與大鼠、貓、兔和人類的相關發現一致。

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