摘要

2024年9月哈爾濱工業大學（深圳）的張嘉恒研究團隊在《Pharmaceuticals》期刊發表了題為"Ionic Liquid-Based Grapeseed Oil Emulsion for Enhanced Anti-Wrinkle Treatment“的研究。該研究針對葡萄籽油功效差、透皮滲透性不佳的問題，結合離子液體與納米技術制備葡萄籽油乳液，探究其透皮滲透能力和抗皺功效。

該研究制備并驗證新型薄荷醇-輔酶Q10離子液體及離子液體基葡萄籽油乳液。證明離子液體基葡萄籽油乳液的透皮滲透效果是普通葡萄籽油乳液的4.63倍，在體外和體內實驗中均表現出功效增強作用。它能清除DPPH自由基、抑制酪氨酸酶活性，減少細胞產生的黑色素和基質金屬蛋白酶-1，同時促進成纖維細胞中I型膠原蛋白的表達。連續使用28天后，該乳液可改善角質層含水量與經表皮失水量，提升皮膚緊致度與彈性，減少眼周紋、眼尾紋、法令紋及木偶紋的總數與長度。

薄荷醇-輔酶Q10離子液體是一種具有潛力的功能性輔料，既能提升透皮遞送效率，又能增強功效。將離子液體與納米技術應用于葡萄籽油面膜，能夠提升產品功效與滲透性。

研究材料與儀器

材料

葡萄籽油、L-薄荷醇、輔酶Q10、甲醇、乙醇、DPPH、辣根過氧化物酶、酪氨酸酶、左旋多巴、焦谷氨酸、PBS緩沖液、乳液基質、人黑色素瘤細胞、小鼠黑色素瘤細胞、人角質形成細胞、人成纖維細胞、3D EpiKutis皮膚模型細胞

儀器

差示掃描量熱儀、傅里葉變換紅外光譜儀、核磁共振波譜儀、多分散粒徑分析儀、高效液相色譜儀、Franz擴散池、酶標儀、ASCH VAPOSCAN經皮水分流失測量儀、皮膚彈性測試儀、皮膚色素分析儀、皮膚黑色素與血紅素測試儀、皮膚顏色測試儀、高壓均質機

 ASCH VAPOSCAN經皮水分流失測量儀

過程

1. 薄荷醇-輔酶Q10離子液體的制備與表征

1. 制備方法：將等摩爾的L-薄荷醇與輔酶Q10置于圓底燒瓶中，在50℃、避光條件下攪拌2小時，制得薄荷醇-輔酶Q10離子液體。

2. 表征手段：采用分子動力學模擬結合Multiwfn程序分析分子間作用力；通過差示掃描量熱儀測定熱性質；利用傅里葉變換紅外光譜儀分析官能團相互作用；借助核磁共振氫譜研究氫原子耦合情況，驗證離子液體的成功制備。

離子液體基葡萄籽油乳液的制備與表征

1. 制備方法：將0.5 g薄荷醇-輔酶Q10離子液體與80 g葡萄籽油均勻分散，得到離子液體葡萄籽油。取9 g GSO-IL與91 g乳液基質混合，在50℃下經600 bar高壓均質處理，制得GSO-ILE，再與膜布結合制成面膜。

2. 表征手段：使用粒徑分析儀測定乳液的粒徑、多分散性指數和zeta電位；通過透射電子顯微鏡觀察乳液微觀形態；采用高效液相色譜儀檢測輔酶Q10含量，開展離心實驗和3個月加速試驗，評估乳液的穩定性。

體外功能實驗

1. 透皮釋放實驗：以3D細胞皮膚模型為載體，采用Franz擴散池法，設置GSO-ILE為實驗組、普通葡萄籽油乳液為對照組，用熒光標記法結合高效液相色譜儀，檢測不同時間點皮膚中輔酶Q10的含量，評估透皮滲透效果。

2. DPPH自由基清除實驗：設置不同體積濃度的GSO-ILE樣本，通過測定517 nm處吸光度，計算自由基清除率，評估其抗氧化能力。

3. 酪氨酸酶抑制實驗：采用生化法，設置對照組、樣本組和陽性對照組，測定475 nm處吸光度，計算酪氨酸酶抑制率。

4. 細胞活性實驗：將不同細胞接種于96孔板，加入不同濃度的GSO-ILE，采用MTT法檢測細胞存活率，評估細胞相容性。

5. 黑色素含量檢測：將小鼠黑色素瘤細胞接種于24孔板，加入不同濃度的GSO-ILE，經培養、裂解后測定405 nm處吸光度，計算黑色素生成抑制率。

6. 成纖維細胞I型膠原蛋白和MMP-1含量檢測：將人成纖維細胞接種于24孔板，加入不同濃度的GSO-ILE，經UVA照射處理后，采用ELISA試劑盒檢測細胞上清液中I型膠原蛋白和MMP-1的含量。

臨床安全性與功效評價

1. 安全性評價：按照《化妝品安全技術規范》開展人體皮膚斑貼試驗，32名受試者使用GSO-ILE面膜，觀察0.5 h、24 h、48 h后的皮膚反應，評估產品安全性。

功效評價：選取30名30-65歲健康志愿者，每日使用GSO-ILE面膜，分別在使用前、使用30 min、第7天、第14天、第28天，采用ASCH VAPOSCAN經皮水分流失測量儀檢測角質層含水量、經表皮失水量、皮膚彈性、緊致度、黑色素指數等指標，同時統計面部皺紋的數量和長度，評估產品的保濕、抗皺、美白功效。

GSO-ILE面膜的臨床功效驗證結果顯示：角質層含水量（圖a）和皮膚彈性值R2（圖c）在30分鐘內分別提升70.7%和12.8%，長期使用28天后分別增加80.4%和14.5%。經皮失水率（圖b）和皮膚緊致度F4（圖d）在30分鐘時分別下降12.5%和18.8%，第28天時分別減少23.4%和28.4%，表明 GSOILE 面膜能顯著提升角質層含水量、改善經皮失水情況，并增強皮膚彈性和緊致度。

結論

該研究成功制備了薄荷醇-輔酶Q10離子液體，其分子間以弱氫鍵為主的分散力及熱性質、紅外光譜特征均證實了離子液體的形成，所制備的GSO-ILE平均粒徑218 nm、zeta電位-33.5 mV，穩定性優異，加速試驗中輔酶Q10含量仍保持90%以上；相較于普通葡萄籽油乳液，它的透皮滲透效率提升4.63倍，能有效穿透皮膚深層，體外實驗更顯示其具備出色的抗氧化能力，還能抑制酪氨酸酶活性、減少黑色素瘤細胞黑色素生成，同時促進成纖維細胞合成I型膠原蛋白、抑制MMP-1產生，兼具美白與抗皺潛力。臨床實驗進一步證實，GSO-ILE面膜安全性高且無皮膚刺激性，連續使用28天可提升角質層含水量、皮膚彈性與緊致度，改善經表皮失水量，有效減少眼周紋、法令紋等面部皺紋的數量和長度，美白與抗皺功效很明顯，這一成效源于薄荷醇與輔酶Q10的協同作用——薄荷醇可改變角質層脂質屏障以提升透皮遞送效率，輔酶Q10能改善皮膚細胞微環境，而離子液體與納米技術的結合，也為化妝品油脂遞送提供了高效可行的新策略。

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